研究论文
许 杉1, 2,胡端端1, 2,陈 瑞1, 2,徐智儒1, 2,刘 莉1, 2*
目的 建立一种高灵敏度的液相色谱- 质谱/ 质谱联用(LC-MS/MS) 法测定人参皂苷CK 在大脑中动脉阻断(MCAO) 模型大鼠体内的含量,研究口服给药后大鼠体内的药物代谢动力学参数变化,为人参皂苷CK 对脑神经保护以及抗炎作用奠定理论基础。方法 正常大鼠及MCAO 模型大鼠100 mg/kg 人参皂苷CK 单次灌胃给药后于不同时间取血及脑组织。大鼠血浆及脑组织匀浆后均采用蛋白沉淀法进行样品前处理,并构建LC-MS/MS 法对人参皂苷CK 进行检测。采用DAS 2.0 软件的非房室模型计算大鼠给药后的药物代谢动力学参数以及MCAO 模型大鼠给药后不同时间点血浆及脑组织的药物浓度。结果 人参皂苷CK 在1 ~ 500 ng/ml 范围内线性关系良好,最低定量下限为1 ng/ml,日内、日间精密度小于13.6%,准确度偏差范围为-5% ~ 13.4%。与正常大鼠相比较,MCAO 模型大鼠血浆t1/2 更长[(2.5±1.1) h 对 (11.0±10.9) h],AUC 值更大 [(14 944±2 170) ng/ml·h 对 (28 882±11 119) ng/ml·h];MCAO 模型大鼠达峰浓度(Cmax) 比正常大鼠略低[(2 834±768) ng/ml 对(2 634±638) ng/ml]。在同一时间点,人参皂苷CK 在MCAO 模型大鼠血浆中比脑组织中分布更多;人参皂苷CK 在正常大鼠体内吸收更快,血药浓度更高。结论 本研究建立的LC-MS/MS 方法灵敏度高、重现性好、样品处理过程方便快速,适用于人参皂苷CK 生物样品分析。模型大鼠人参皂苷CK 脑血含量比很低,脑内分布较少,提示人参皂苷CK 可能并非通过增加脑内物质基础的途径而产生神经保护作用。