研究论文
吴海永 , 任瑾卓, 宫志鹏 , 张 雁 , 张 华
目的 探讨组蛋白乳酸化修饰在肺癌细胞恶性生物学行为及顺铂耐药中的作用及分子机制。方法 采用免疫印迹法检
测肺癌组织及细胞中泛赖氨酸乳酸化 (Pan-Kla) 和组蛋白乳酸化位点修饰水平;利用 2- 脱氧 -D- 葡萄糖 (2-deoxy-D-glucose,
2-DG) 处理 A549 和 A549/DDP 细胞,通过 CCK-8 法、Transwell 实验、流式细胞术及免疫印迹法分析细胞增殖、迁移、
凋亡及耐药性相关指标。结合转录组测序筛选 H3K18la 下游靶基因,通过染色质免疫沉淀 (chromatin immunoprecipitation,
ChIP) 验证结合关系,并采用实时荧光定量聚合酶链反应检测泛素特异性蛋白酶 (ubiquitin specific protease,USP)7 表达
水平 ;进一步研究 USP7 对肺癌细胞生物学行为及顺铂耐药的影响。结果 肺癌组织及细胞中 Pan-Kla 及 H3K18la 乳酸化
修饰显著升高;2-DG 处理后,A549 和 A549/DDP 细胞的 Pan-Kla 及 H3K18la 水平呈剂量依赖性降低 (P < 0.01),同时 2-DG
组细胞增殖、迁移受到抑制,凋亡率升高,A549/DDP 细胞耐药性半抑制浓度降低 (P < 0.05)。ChIP 证实 H3K18la 富集
于 USP7 启动子区并促进其转录 ;肺癌中 USP7 表达上调,敲低 USP7 可抑制细胞增殖迁移,促进凋亡,并降低耐药相关
蛋白表达 (P < 0.01)。USP7 过表达可部分逆转 2-DG 的抑制作用。结论 肺癌中组蛋白乳酸化修饰,特别是 H3K18la,通
过上调 USP7 表达,促进恶行生物学行为及顺铂耐药,参与肺癌进展。