研究论文
王茂,代引海,李宏,周智辉,李媛媛,李福平,程瑞,李尚鹏
目的 探讨婆罗双树样基因 4(Spalt-like transcription factor 4,SALL4)对乳腺癌细胞阿霉素(adriamycin,ADR)耐药的影
响及其调控机制。方法 采用定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-mediated polymerase chain reaction,
qRT-PCR) 法及免疫印迹法(western blot,WB) 分别检测乳腺癌细胞系中SALL4 表达;构建沉默SALL4 的乳腺癌耐药细胞
系短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)-SALL4 巨噬细胞趋化因子(macrophage chemotactic factor,MCF)-7/ADR,采
用细胞增殖实验及流式细胞仪检测SALL4 对细胞增殖活性、半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50) 及细胞凋亡
率的影响;分别检测SALL4 对人第10 号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphate and tension homology deleted
on chromsome ten,PTEN) 表达,PTEN/ 蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)/ 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of
rapamycin,mTOR) 通路关键基因及细胞耐药基因表达的影响。结果 乳腺癌细胞系中SALL4 信使RNA(messenger RNA,
mRNA) 和蛋白水平较正常乳腺细胞系明显升高(P < 0.05)。shRNA-SALL4 MCF-7/ADR 组细胞IC50 值显著降低,细胞
增殖活性下降,细胞凋亡率显著升高;细胞耐药基因ABCB1、C-myc 和ABCG2 表达显著降低(P < 0.05)。shRNA-SALL4
MCF-7/ADR 组细胞PTEN 表达量显著上升磷酸化PKB(phosphorylated PKB,p-PKB)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
(phosphorylated mTOR,p-mTOR) 表达量显著下降(P < 0.05)。在阿霉素处理细胞后加入PTEN 抑制剂,shRNA-SALL4
MCF-7/ADR 组细胞凋亡率及细胞耐药基因表达量无显著变化。结论 SALL4 可能通过PTEN/PKB/mTOR 通路增强乳腺癌
细胞增殖,抑制细胞死亡,一定程度上逆转了阿霉素耐药进程。