研究论文
王芹, 胡静静, 岳超
目的 探究糖基转移酶8含结构域2(glycosyltransferase 8 domain containing 2,GLT8D2)在胃癌(gastric cancer,GC)中的表达及其分子机制。方法转染处理GC细胞(MGC-803 和AGS)分为peDNA3.1 载体组、peDNA-GLT8D2组、sh-正常对照(nomal control,NC)组、sh-GLT8D2组、sh-GLT8D2+ Fer-1组、sh-p53 组及 sh-GLT8D2+ sh-p53 组。采用逆转录定量聚合酶链式反应和免疫印迹法(westem blotting,WB)检测GC肿瘤组织和 GC细胞中 GLT8D2 mRNA和 GLT8D2蛋白表达水平。采用5-乙炔基-2脱氧尿嘧啶核苷(5-cthynyl-2-deoxyuridine,EdU)染色检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭情况;WB检测铁死亡关键蛋白表达水平。结果 与癌旁组织和人胃黏膜细胞相比,GLT8D2在GC组织及细胞中表达显著上调(P<0.001)。与poDNA-3.1 载体组相比,pcDNA-GLT8D2组MGC-803 和AGS细胞中的GLT8D2 mRNA和GLT8D2蛋白水平显著升高,且促进细胞的增殖和侵袭(P<0.001)。与sh-NC组相比,sh-GLT8D2组MGC-803 和 AGS细胞中 GLT8D2 mRNA和GLT8D2蛋自水平显著降低(P<0.001),活性氧(teactive oxygen species,ROS)水平显著升高,溶质载体家族7成员11 (solute camrier family 7 member 11,SLC7Al1)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase.GPX)4 和谷胱甘肤(glutathione,GSH)蛋白水平显著降低(P<0.001)。与sh-GLT8D2组相比,sh-GLT8D2+Fer-1组MGC-803和AGS细胞中ROS水平显著降低,SLC7A11、GPX4和GSH蛋自水平显著升高(P<0.001)。与sh-GLT8D2组相比,sh-GLT8D2+sh-p53组MGC-803 和AGS细胞中GLT8D2蛋自水平升高,p53蛋自水平降低(P<0.001)。与sh-GLT8D2组相比,sh-GLT8D2+sh-p53组MGC-803 和 AGS 细胞中的ROS 水平降低,SLC7A11、GPX4 和 GSH蛋白水平升高(P<0.001)。结论 GLT8D2在GC中显著上调,过表达GLT8D2通过调节p53/SLC7A11 轴抑制铁死亡,促进GC细胞增殖和侵袭,从而促进GC进展,为开发新的有效的GC治疗靶点提供一定的理论基础。