研究论文
毛丹, 陈莉, 常伟, 张丛丛, 李银玲, 索晓慧
目的 赖氨酸去甲基化酶(lysine demethylase,KDM)5B 对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML) 细胞生
物学功能的影响和机制研究。方法 收集23 例AML 患者和20 例健康捐献者的外周血及骨髓标本,比较KDM5B 水平表达。
采用KDM5B 的短发夹核糖核酸(shorthairpinRNA,shRNA)(sh-KDM5B) 和过表达载体(KDM5B),组织蛋白酶(cathepsin,
CTS)F 的shRNA(sh-CTSF) 和过表达载体(CTSF),以及B 细胞淋巴瘤(B-cell lymphoma,BCL)-2 的shRNA(sh-BCL-2)
转染AML 细胞HL-60。采用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP) 分析KDM5B 与CTSF 启动子的结合,
ChIP 分析CTSF 与BCL-2 蛋白的相互作用。CCK-8 检测和Transwell 实验用于检测细胞的增殖和侵袭能力,流式细胞术
分析细胞凋亡数。结果 AML 患者外周血及骨髓标本中KDM5B 表达明显高于健康捐献者(P < 0.01);AML 细胞(HL-60、
ML-1) 中KDM5B 表达较人骨髓细胞HS-27A 表达显著上调(P < 0.01)。敲除KDM5B 显著抑制AML 细胞增殖和侵袭,
诱导细胞凋亡(P < 0.01)。KDM5B 通过与CTSF 启动子结合并上调CTSF 表达,上调的CTSF 通过与BCL-2 蛋白相互作
用抑制其蛋白表达。敲除CTSF 抑制细胞增殖和侵袭,诱导细胞凋亡(P < 0.01),敲除BCL-2 可抵消CTSF 敲除对AML
细胞的影响(P < 0.05)。结论 KDM5B 在AML 中显著上调,其过表达通过上调CTSF 表达并抑制BCL-2 表达,从而促
进AML 细胞增殖和侵袭,抑制细胞凋亡。